氨基酸分析柱作為一種高效液相色譜柱,主要用于氨基酸的分離與檢測。它的工作原理基于分離層析法,通過柱芯與氨基酸之間的化學反應來實現(xiàn)對氨基酸的分離。柱芯的表面結構對于分離效果至關重要,常見的表面結構包括無機酸活性表面、有機酸活性表面和電子受體表面。
氨基酸分析柱其主要功能和應用:
1、分離氨基酸:利用陽離子交換樹脂填充的分析柱可以有效分離混合氨基酸。氨基酸混合物在流動相(緩沖溶液)的推動下流經色譜柱時,不同氨基酸與樹脂中的交換基團發(fā)生離子交換,從而實現(xiàn)分離。
2、定性定量分析:分離出的單個氨基酸組分會與茚三酮試劑發(fā)生反應,生成紫色或黃色化合物,然后通過吸光度檢測器進行檢測。這些有色產物的吸收強度與各氨基酸濃度成正比,符合朗伯-比爾定律,從而可以進行氨基酸的定性和定量分析。
3、應用于多種領域:全自動氨基酸分析儀主要應用于各種物質中18種氨基酸的定性定量分析,例如在飼料行業(yè)中,測定原料和產品中的氨基酸含量,以保證質量。
4、系統(tǒng)多樣性:氨基酸分析柱通常分為蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng)),兩者使用的洗脫液和pH值不同,因此可以分析的氨基酸種類和數(shù)量也不同。鈉鹽系統(tǒng)適合快速分析約25種氨基酸,而鋰鹽系統(tǒng)則可以分析多達約50種氨基酸,但速度較慢。